La prova ELISA és un examen mèdic de laboratori, durant la realització del qual es produeix l’anomenada reacció antigen-anticòs. Es poden provar diferents antígens que tenen un paper en la medicina humana o veterinària. Només els instituts de laboratori acreditats tenen l’encàrrec de realitzar la prova a Alemanya.
Què és el procediment?
Dins dels exàmens mèdics de laboratori, la prova ELISA pertany als anomenats procediments immunològics. Mitjançant el procediment de prova, proteïna molècules es pot detectar de manera molt diferent fluids corporals. ELISA és l’abreviatura de l’assaig immunoabsorbent enzimàtic lligat. Es tracta, per tant, d’una designació en anglès que s’ha consolidat en l’ús mèdic alemany. La prova ELISA pertany als anomenats procediments immunològics dins dels exàmens mèdics de laboratori. El procediment de prova es pot utilitzar per detectar proteïnes molècules en una àmplia varietat de fluids corporals. La detecció d’aquests molècules al seu torn, permet treure conclusions sobre certes malalties o quadres clínics, motiu pel qual els metges també depenen el seu diagnòstic del resultat d’aquesta prova ELISA. Per tant, el procediment de prova té una gran importància en la pràctica clínica diària, ja sigui en un entorn ambulatori o internat. El corresponent fluids corporals, per exemple, sencer sang o fluids de articulacions, s’envien al laboratori immediatament després de ser recollides del pacient. Normalment són mostres força urgents, perquè el material autòcton es considera sensible i s’hauria d’examinar el més ràpidament possible. Les anomenades mostres superposades poden lead a falsos resultats negatius perquè el patològic proteïnes Mentrestant, per detectar s'han reduït o completament degradat. Per tant, els anomenats preanalítics tenen un paper important a ELISA; els resultats sospitosos o negatius s'han de repetir de nou si hi ha símptomes clínics adequats.
Funció, efecte i objectius
Per a un funcionament correcte de les proves en un laboratori mèdic acreditat, són absolutament necessaris tubs d’assaig i les anomenades plaques de microtitolació. Aquestes plaques amb fines ranures semicòncaves estan fetes de plàstic especial i estan recobertes amb un anticòs molt específic. Si l’antigen que s’ha de detectar és present en un fluid corporal que s’ha d’examinar, es produeix una reacció específica antigen-anticòs segons l’anomenat principi de bloqueig. El material de mostra es pot inserir a les plaques manualment pel personal del laboratori mitjançant pipetes o totalment automàticament. Als instituts mèdics de laboratori moderns, només s’utilitzen sistemes completament automatitzats per al diagnòstic ELISA. No obstant això, han de ser supervisats per personal format, assistents de laboratori mèdic-tècnic. L’anomenat control de qualitat intern i extern també és responsabilitat del personal del laboratori, superior al personal mèdic de medicina de laboratori, malaltia infecciosa epidemiologia i microbiologia. Després del primer lot de prova, és a dir, després que el material s'hagi pipetat a les plaques, els antígens específics de la mostra, si n'hi ha, ja s'han unit al anticossos a la placa de plàstic. A continuació, es realitza un rentat amb sèrum fisiològic per eliminar factors interferents, com ara antígens no desitjats o proteïnes de la preparació. Aquest pas és molt important per evitar falses reaccions positives. Un resultat fals positiu interpretat pel laboratori pot tenir conseqüències fatals per a un pacient. En el segon pas de la prova, s’afegeix un altre anticòs que s’acobla a un enzim. Aquest anticòs marcat també s’uneix a l’antigen. En un tercer i últim pas, s’afegeix un colorant especial en una quantitat definida, que és degradada en major o menor mesura pels residus d’enzims que encara hi són presents. Només es pot degradar aquest enzim, que anteriorment no estava unit a l'antigen juntament amb l'anticòs. L’enzim lliure és capaç de trencar el colorant afegit. La quantitat exacta del colorant trencat es pot determinar amb precisió amb un altre mètode de laboratori, l’anomenada fotometria. Això permet extreure conclusions precises sobre si l’antigen està present en un material de mostra i, en cas afirmatiu, quant. sinó també per controlar el seu progrés. Si l’antigen concentració a la prova es fa més baixa durant el transcurs de teràpia, la teràpia es considera reeixida.
Riscos, efectes secundaris i perills
La prova ELISA obté el seu valor informatiu principalment a través de la detecció d’estructures antigèniques en fluids corporals. La prova permet una afirmació anomenada qualitativa, però també semiquantitativa i quantitativa, sobre la presumpta presència de certs antígens en els fluids corporals. Tot sang no es pot utilitzar per a la prova, només sèrum sanguini. Una prova directa sobre el pacient, per exemple des del capil·lar sang dels punta dels dits, per tant, no és possible, fins ara, com amb altres proves serològiques. En medicina humana, la prova ELISA s’utilitza principalment per detectar antígens en infeccions bacterianes, víriques o fúngiques. A més, tots els resultats positius de hepatitis la serologia es torna a comprovar amb una prova ELISA de sèrie. Cert les hormones, per exemple el embaràs hormona HCG, també es pot determinar amb la prova ELISA. Si es produeixen certes complicacions durant embaràs, coneixement precís de la concentració de l’hormona de l’embaràs a la sang és molt útil diagnòsticament i terapèuticament. Una altra indicació per a la prova és la detecció de les anomenades paraproteïnes a l’orina, ja que es produeixen, per exemple, en diverses malalties tumorals, com el mieloma múltiple. La prova ELISA encara es realitza en molts laboratoris actualment, però és considerada obsoleta pels experts. La reacció immune es va unir a enzims a la prova ELISA s'ha substituït cada cop més en els darrers anys per etiquetes radioactives anticossos, que proporcionen un resultat de mesurament quantitatiu encara millor. Aquestes proves també s’anomenen RIA, Assaig Immunabsorbent de Ràdio. Altres avanços específics d’ELISA són mètodes químics lleugers com la luminiscència o la fluorescència.
