Anàlisi de seccions congelades
Això és necessari si el cirurgià necessita informació sobre el teixit retirat durant una operació per decidir el curs del procediment. Per exemple, s'elimina un petit tumor maligne de la ronyó. Ara es requereix una incisió ràpida per veure si el tumor s'ha eliminat completament o si encara hi ha quantitats massives de teixit maligne a les vores de les mostres de teixit.
Al final, el resultat de l'examen de secció congelada determina el curs de l'operació i el pla de teràpia posterior del pacient. Com funciona un examen de secció congelada? Al cap de 10 minuts, el teixit s’estabilitza congelant-se a -20 ° C i es fa una incisió de 5-10 μm de gruix a l’anomenat microtoma. Es col·loca sobre un portaobjectes, una petita placa de vidre i es taca ràpidament. Al final, les conclusions s’examinen al microscopi i el resultat es pot reenviar immediatament al quiròfan.
Mètodes de tinció
Durant els darrers 120 anys s’han desenvolupat molts mètodes de tinció histològica. Les estructures i teixits cel·lulars es divideixen en cèl·lules basòfiles, acidòfiles i neutròfiles en funció de la reacció del color amb els agents tincibles. A més, també hi ha estructures agiròfiles i nucleòfiles.
Les basòfiles tenyeixen tot el que conté un grup àcid i es tenyeix amb un colorant bàsic (per exemple, hematoxilina o blau de metilè). Les estructures acidòfiles són bàsiques i, per tant, es poden tacar amb l’erosió o la fucsina àcida (colorants àcids). Aquests inclouen el citoplasma i col·lagen fibres.
Els components neutrofílics o lipòfils no poden reaccionar ni amb un colorant àcid ni amb un bàsic i, per tant, no es poden tacar. Els components agiròfils poden unir ions de plata i convertir-los en plata elemental. Una reacció de color nucleòfila (nucli = nucli cel·lular, amant del nucli cel·lular) resulta de colorants nucleòfils a el nucli cel·lularSón substàncies bàsiques que s’uneixen a l’ADN o que s’uneixen als àcids nucleics.
Avui, els mètodes de tinció química ben provats s’han complementat amb mètodes immunològics. La reacció antigen-anticòs s’utilitza en aquesta tècnica per detectar determinades propietats cel·lulars. La reacció es pot fer visible mitjançant una tècnica sofisticada.
Els mètodes de tinció més freqüents són: tinció HE = tinció hematoxilina-eosina: l’hematoxilina, un colorant natural, taca totes les estructures de blau, que són basòfiles (= amants de les bases) i, per tant, àcides, com ara l’ADN, els nuclis cel·lulars, ribosomes, etc. L'eosina, en canvi, es produeix sintèticament. L’eosina taca de vermell totes les estructures cel·lulars si són acidòfiles (= amants dels àcids) o bàsiques.
El proteïnes del citoplasma, mitocòndriesi col·lagen estan entre ells. Tinció Azan: es compon de les primeres lletres dels dos colors, azocarmina G i anilina blau-taronja daurat: el nucli cel·lular i les fibres musculars vermelles i el citoplasma vermellós. el col·lagen i les fibres reticulars es tornen blaves en aquesta tinció.
La taca de Giemsa (Azems-Eosin-Blue Methylene de Giemsa) s’utilitza per tacar sang frotis de cèl·lules. Els nuclis cel·lulars es poden reconèixer fàcilment per la reacció del color porpra. El citoplasma es taca de color blavós.
En la tinció elastica (resorcinol-fuchsin-orceina), totes les fibres elàstiques es mostren en negre-violeta. El mètode de tinció de Van Gieson es caracteritza pel fet que la tinció es realitza primer amb hematoxilina. A continuació, s’utilitza fuchsina d’àcid pícric (micro fuchsin) o tiazina d’àcid pícric.
Al final, els nuclis cel·lulars apareixen marró negre-fosc, el citoplasma apareix més aviat marró clar. La tiazina amb àcid pícric taca les fibres elàstiques i el teixit muscular de color groc taronja i les fibres de col·lagen de color vermell. En la tinció de tricrom segons Masson-Goldner, la mida de la molècula de colorant és el factor més important del mètode de tinció.
S'utilitza hematoxilina de ferro, normalment amb tres colorants addicionals, la guineu àcida, la taronja G i el verd clar. Es taca de col·lagenós teixit connectiu i moc verd, nuclis cel·lulars blau-negre, citoplasma vermell, músculs vermell pàl·lid i vermell sang cèl · lules (eritròcits) vermell ataronjat. A més, hi ha una tinció de Gram, que serveix per diferenciar-se els bacteris.
Gram positiu els bacteris es tenyeixen de blau i els bacteris gram negatius es tenyeixen de vermell. També s’utilitza la tinció Ziehl-Neelsen els bacteris, és a dir, aquells que són resistents als àcids i, per exemple, es mostren tuberculosi patògens en vermell. Altres mètodes de tinció que s’han d’esmentar aquí són la reacció Berlin-Blue, que s’encarrega de la detecció d’ions de ferro trivalents en seccions de teixits, i el mètode de tinció de l’hematoxilina de ferro segons Heidenhain.
