Solter-general l’anàlisi és un mètode específic de proves genètiques.
En el marc d’aquest procediment, si se sospita d’una malaltia hereditària, que es desencadena per un sol canvi en un general, s’examina el gen que se sospita que és causal. Això també es fa sovint de manera rutinària com a part dels exàmens de detecció.
Indicacions (àrees d'aplicació)
- Diagnòstic de malalties monogèniques, per exemple fibrosi quística.
el procediment
Material necessari
- Sang d’heparina (mínim 1-2 ml)
Preparació del pacient
- not necessary
Factors disruptius
- No se’n coneix cap
El mètode de laboratori
Molt sovint, el mètode de seqüenciació utilitzat engeneral L'anàlisi és el mètode de Sanger, també anomenat síntesi de terminació de cadena, on es tracta per primera vegada de l'aïllament de l'ADN del sang. Després, tot hidrogen es trenquen els enllaços que serveixen per mantenir l’ADN bicatenari. Després d’escalfar-se a 94-96 ° C durant un minut, hi ha dos fils únics. A continuació, es produeix l'anomenada hibridació de primers, mitjançant la qual s'uneix un primer. Això té lloc a uns 60 ° C. Un cebador és un oligonucleòtid (oligòmers composts d’uns quants nucleòtids) que serveix de punt de partida per a la replicació de l’ADN enzims com l’ADN polimerasa. Després de la hibridació del cebador, es produeix una extensió, en què la temperatura augmenta a 72 ° C. Això permet que la imprimació s’uneixi a l’ADN polimerasa (enzims que sintetitzen l’ADN). Després d’una mitjana de 30 cicles, es pot aturar el procediment.
Anàlisi posterior es realitza per capil·lar electroforesi en seqüenciadors automatitzats. El resultat s’anomena electropherograma. Es mostren diferents colors que indiquen la seqüència base.
Mitjançant aquest mètode, es poden detectar mutacions que impliquen només una única base nucleica dins d’un gen, també conegudes com a mutacions puntuals.
