Detecció d’estructures de teixits, anticossosi patògens per immunomarcatge és popular, modern i precís. La immunofluorescència es refereix a la immunomarcatge amb fluorescents preparats anticossos que es fan brillar sota la llum UV. En la detecció directa d’immunofluorescència, el substrat de prova s’examina directament amb luminescent anticossos, sense anticossos primaris ni antígens artificials aigües amunt.
Què és la detecció directa d’immunofluorescència?
Els antígens tumorals específics del teixit tumoral es poden detectar directament amb immunofluorescència. Així, és possible esbrinar on existeix el cos metàstasi va venir de. La detecció directa d’immunofluorescència és un mètode diagnòstic basat en troballes en immunologia, immunotinció i immunohistoquímica. El focus aquí es centra en la capacitat dels anticossos per unir-se a llocs específics del teixit o en antígens del sèrum. Aquests llocs són epítops. En el diagnòstic bioquímic, hi ha anticossos artificials o mimètics (singular: mimètics) que permeten l’etiquetatge d’aquests enllaços anticòs-antigen per fluorescència o radioactivitat. De fet, els conjugats d’anticossos artificials s’uneixen als epítops per una banda i tenen un marcador fluorescent en cas d’immunofluorescència per altra banda. Aquesta és una alternativa a l’ús de marcadors radioactius. La característica especial de les deteccions directes d’immunofluorescència en comparació amb les deteccions indirectes és que l’anticòs que s’uneix a l’epítop de l’antigen del material examinat és al mateix temps l’anticòs conjugat amb el marcador fluorescent. No són necessaris anticossos addicionals per a la interposició per a la detecció directa. En immunofluorescència, fluoresceïna, que brilla sota la llum ultraviolada, i s’utilitzen isotiocianats de fluoresceïna (FITC) colorants per construir els conjugats d’anticossos artificials. En la mesura que es llegeix una mica complicat, però les deteccions directes d’immunofluorescència són mètodes estàndard de medicina diagnòstic de laboratori per a nombrosos problemes mèdics diferents. Els anticossos que contenen el colorant fluorescent estan disponibles a la venda.
Funció, efecte i objectius
Hi ha disponibles detectors directes d’immunofluorescència per a estudis de teixits per tenyir estructures específiques en el teixit. Però també existeixen per a cèl·lules individuals. Aquí és on la citometria de flux juga un paper important. I, finalment, hi ha els immunoassaigs que consisteixen en fases sòlides i líquides. Els estudis d’immunofluorescència de teixits són importants sobretot en oncologia, és a dir, en el tractament mèdic de càncer. Els antígens tumorals específics del teixit tumoral es poden detectar directament amb immunofluorescència. Aquests exàmens de mostres de teixits de tumors sovint són importants per esbrinar on existeix el cos metàstasi han vingut, o també per formular un judici sobre si un tumor és benigne o maligne. L'examen de cèl·lules individuals amb detecció directa d'immunofluorescència s'utilitza per trobar antígens vírics, antígens bacterians i altres epítops. Per exemple, s’aprèn si les cèl·lules estan infectades per un virus i en quina fase del cicle d’infecció es troben. FACS (= classificació de cèl·lules activades per fluorescència) és un mètode de citometria de flux d’alta eficiència en el qual les cèl·lules marcades amb fluorescència es distribueixen a diferents tubs d’assaig en funció del tipus de tinció. Aquest mètode és important en immunologia, hematologia i infectiologia. Els immunoassaigs per immunofluorescència permeten la detecció directa de toxines ambientals, organismes modificats genèticament i certs additius en els aliments. En aquesta configuració experimental, sempre hi ha una fase sòlida i una fase líquida. Nombroses patògens, Incloent el SIDA-que causa virus HI, també es podria detectar directament. No obstant això, quan es detecta infecciós i malalties autoimmunitàries, l'objectiu és sovint detectar anticossos en lloc d'antígens. Aquestes són la defensa molècules produït pel propi cos sistema immune. Aquestes deteccions no són, doncs, deteccions directes segons la definició que es presenta aquí, ja que els anticossos fluorescents no s’acoblen directament als antígens propis del cos, sinó als antígens del conjunt de la prova. Aquests antígens del conjunt experimental es relacionen al seu torn amb els anticossos endògens. Només en proves especials de detecció i confirmació són deteccions directes d’immunofluorescència utilitzades per a infeccions comunes, per exemple per HI virus i Chlamydia. Hi ha proves per a moltes altres malalties. En la majoria de situacions, la detecció indirecta d’anticossos és millor enfermetats infeccioses perquè del cos sistema immune té una capacitat enginyosa per recordar infeccions anteriors. En altres situacions, la detecció directa d’antígens i la detecció indirecta d’anticossos es complementen. Els segons mostren que s’ha produït una infecció abans, mentre que els primers proporcionen informació més precisa sobre l’estat actual de l’activitat dels patògens.
Riscos, efectes secundaris i perills
Amb la detecció directa per immunofluorescència, com passa amb totes les deteccions mèdiques, hi ha dos riscos: el risc d’un resultat fals positiu i el risc d’un resultat fals negatiu. Els falsos resultats positius causen molèsties psicològiques i molèsties molt grans al pacient. Per tant, s’afegeixen procediments de proves addicionals als resultats positius, especialment quan el diagnòstic comporta canvis dràstics en la vida. El perill d’un resultat falsament negatiu és que el pacient no aprengui a temps sobre l’amenaça per als seus health i potser fins i tot a la salut pública. Per tant, és bo fer moltes investigacions i preparar i oferir un gran nombre de deteccions directes d’immunofluorescència diferents. Juntament amb altres mètodes de detecció directa i indirecta de malalties i patologies, això augmenta la precisió del diagnòstic. Les deteccions directes es basen en el conjugat d’anticossos, que d’una banda s’uneix als epítops dels antígens i, de l’altra, també provoca la fluorescència al mateix temps. Per tant, aquest producte només s’utilitza en un tipus de procediment de prova i no s’utilitza per a altres tipus de proves. Aquesta és una diferència procedimental important respecte a la detecció indirecta, en què els anticossos primaris s’utilitzen aigües amunt dels anticossos fluorescents per unir-se a l’epítop. Per tant, el conjugat anticòs és adequat per a diferents assajos. Aquesta diferència procedimental és diferent de la diferència mèdica entre la detecció indirecta d’anticossos i la detecció directa d’antígens.
