El diagnòstic de pre-fertilització ofereix la possibilitat de fer proves genètiques de la dona ous com a part fertilització in vitro (FIV). Les proves es realitzen al cromosomes del 1r i 2n cossos polars, que es formen durant la 1a i 2a divisió de maduració després de la introducció d’un mascle esperma a l’ou. El mètode té l'avantatge que no es tracta d'un diagnòstic genètic preimplantacional (PGD) perquè l'examen es realitza abans de la fusió dels nuclis femení i masculí, de manera que es permet el diagnòstic genètic de prefertilització en alguns països amb prohibicions de PGD.
Què és el diagnòstic de fertilització?
El diagnòstic de pre-fertilització ofereix la possibilitat de fer proves genètiques de la dona ous en el context de fertilització in vitro. El diagnòstic de prefertilització crea la possibilitat de detectar aberracions cromosòmiques en el genoma haploide de l’oòcit femení en el context de fertilització in vitro (FIV). En particular, certes desviacions numèriques cromosomes (aneuploidia) i anomalies de determinats gens que causen malalties hereditàries es poden detectar. Quan un mascle esperma s’introdueix al citoplasma de la cèl·lula de l’òvul durant la FIV, inicia primer la primera i la segona divisió de maduració (meiosi I i II) a l’òvul. En cada cas, dues cèl·lules “superflues”, els cossos polars, que tenen el mateix conjunt de cromosomes com el propi oòcit, es produeixen com a resultat de la divisió. Els cossos polars, que normalment serien desglossats pel cos, són eliminats pel cos polar biòpsia for anàlisi de cromosomes. Atès que el diagnòstic de prefertilitat sempre es realitza als cossos polars, el procediment també s’anomena diagnòstic de cos polar (PCD). L’avantatge del mètode d’examen és que es pot realitzar fins i tot en alguns països on es prohibeix el diagnòstic genètic de preimplantació (PGD), perquè l’examen es realitza al genoma de la cèl·lula d’òvul quan els nuclis de la esperma la cèl·lula i l’òvula encara no s’han fusionat. El desavantatge és que només es poden examinar les aberracions cromosòmiques del genoma matern. Els cromosomes de l’esperma introduïts al citoplasma de la cèl·lula de l’òvul no es poden detectar mitjançant aquest mètode. Les malalties lligades a Y no es poden detectar perquè el conjunt de cromosomes haploides de l'oòcit no pot contenir un cromosoma Y.
Funció, efecte i objectius
Els diagnòstics de prefertilització en forma de proves genètiques del cos polar poden detectar anomalies numèriques (aneuploidia) en determinats cromosomes del genoma matern, així com translocacions mitjançant les quals els segments de cromosomes han estat separats i reinserits en una ubicació incorrecta. A més, X-linked general es poden diagnosticar mutacions heretades per la mare i basades en la mutació d’un sol gen (malaltia monogenètica). Això requereix que es conegui la possible malaltia hereditària per tal de dirigir-se a una determinada general al cromosoma X. En el cas de l’herència recessiva, hi ha la possibilitat que el cromosoma X del cos polar i, per tant, també el cromosoma X de l’òvul fecundat, contingui l’al·lel saludable del corresponent general. El procediment en si implica un cos polar biòpsia, en què els dos cossos polars haploides s’eliminen de l’òvul i els cromosomes són sotmesos a FISH (hibridació in situ de fluorescència) proves. El biòpsia dels cossos polars suposa un enorme repte per al laboratori que realitza la prova perquè la identificació i aïllament dels cossos polars requereix una certa experiència. Per al procediment de prova FISH, hi ha disponibles les anomenades sondes d’ADN per a cromosomes seleccionats, que es combinen amb els corresponents cromosomes haploides perquè tenen la seqüència complementària d’aminoàcids. Les sondes d'ADN estan marcades amb diferents colors fluorescents perquè els cromosomes puguin ser identificats posteriorment mitjançant un programari especial i comptabilitzats en un procediment automatitzat. La majoria de les aberracions cromosòmiques com les aneuploidies i els canvis cromosòmics dins d’un cromosoma són letals. Això significa que o no es forma zigot durant la FIV, o bé embrió es rebutja després trasplantament a la úter, o n’hi ha d’hora o tard avortament involuntari. Des de la freqüència d’aberracions cromosòmiques en dones ous augmenta amb l’edat, un objectiu important del diagnòstic de la prefertilitat és una selecció positiva d’òvuls fecundats. Només els ous fecundats amb genoma intacte, fins on es reconeixen, es tornen a trasplantar al úter. La selecció positiva està destinada a augmentar el embaràs valora després de la FIV i redueix la taxa d’òvuls fecundats rebutjats i el nombre d’avortaments involuntaris. Un altre objectiu és excloure les malalties hereditàries basades en aberracions cromosòmiques o certs defectes genètics en l’òvul fecundat re-trasplantat des de la selecció positiva dels ous fecundats. Inclouen les malalties heretades típiques que poden ser excloses per la prova fibrosi quística, atròfia muscular espinal, i cèl·lula falciforme anèmia.
Riscos, efectes secundaris i perills
Els diagnòstics de fertilització es realitzen fora del cos i, per tant, no suposen cap risc físic addicional per a la dona implicada. Els riscos físics menors de lesions i infeccions només s’associen a la recuperació d’òvuls. A diferència del PGD, que també implica un examen cromosòmic mitjançant la prova FISH, en els diagnòstics de prefertilitat només es pot examinar el material cromosòmic i genètic de la mare. Això significa que si la prova FISH és negativa i no es diagnostiquen aberracions cromosòmiques o genètiques, els pares poden tenir expectatives excessivament positives sobre el transcurs de la embaràs i posterior naixement. No es registren aberracions cromosòmiques del genoma patern i possiblement anomalies existents del cromosoma Y, que poden causar una malaltia hereditària relacionada amb el sexe. En aquest sentit, el diagnòstic de prefertilització és fins i tot més incomplet que el PGD, en què es troba tot el genoma del embrió es pot examinar a la fase de blàstula. Tanmateix, fins i tot en el cas d’un PGD negatiu, no es pot excloure la presència de defectes genètics en el genoma de la embrió, que pot causar mal desenvolupament i possiblement lead a deficiències després del naixement. La prova FISH només es pot referir sempre a gens i cromosomes seleccionats.
