La prova FISH és una prova microscòpica del cromosoma que s’utilitza en el diagnòstic prenatal i de carcinoma de càncer de mama, càncer gàstric i en limfocítics crònics leucèmia. La prova, el resultat de la qual està disponible en un termini d’1 a 2 dies, permet detectar principalment anomalies cromosòmiques que es deuen a un conjunt de cromosomes. La prova es realitza exclusivament com a prova complementària o preliminar per obtenir informació detallada anàlisi de cromosomes, els resultats dels quals poden no estar disponibles fins a 2 o 3 setmanes després de la collita de les cèl·lules.
Què és la prova FISH?
A la prova, el resultat de la qual està disponible en un termini d’1 a 2 dies, és possible detectar principalment anomalies cromosòmiques degudes a un conjunt alterat de cromosomes de certs cromosomes. La prova FISH (hibridació in situ de fluorescència) in diagnòstic prenatal permet treure conclusions sobre un conjunt de cromosomes alterats en el cas de certs cromosomes. Per realitzar la prova FISH, almenys 50 cèl·lules fetals no cultivades (cèl·lules amniòtiques) extretes de la líquid amniòtic (aproximadament 2 - 3 ml) són necessaris. Un mètode alternatiu per obtenir cèl·lules adequades és mostreig de vellositats corioniques, en què les cèl·lules són preses per biòpsia de la regió del cordó umbilical adjunt. Un procediment especial permet distingir les cadenes individuals dels cromosomes 13, 18, 21 i els cromosomes X i Y entre ells per colors fluorescents, de manera que qualsevol trisomia present s’indica amb la presència de tres cadenes homòlegs d’un cromosoma. . En gàstrica i càncer de mama, la prova FISH es pot utilitzar per comprovar si el tumor té més de dues còpies del HER2 / neu general (receptor del factor de creixement epidèrmic humà), que té conseqüències per al tipus de quimioteràpia. En limfocítics crònics leucèmia malaltia, anàlisis múltiples de proves FISH de medul · la òssia i perifèric sang les mostres poden identificar els canvis cromosòmics més freqüents en gens específics, cosa que també té implicacions teràpia.
Funció, efecte i objectius
Els cromosomes dels nuclis aïllats s’indueixen a dividir la seva estructura de doble hèlix mitjançant un tractament químic especial o per exposició a la calor, i les sondes d’ADN específiques dels cromosomes, cadascuna amb la seva seqüència d’ADN complementària, es connecten als “seus” cromosomes específics. Les sondes d’ADN s’etiqueten amb diferents colors fluorescents de manera que es pot utilitzar un programari especial per distingir els cromosomes etiquetats entre ells i comptar-los en un procés automatitzat. Es coneixen, per exemple, les trisomies, en què es troben tres cadenes de cromosomes en lloc de dos per a un cromosoma. També es coneixen les anomenades monosomies, en què només hi ha una cadena del cromosoma X, així com tres o quatre cadenes homòlegs de tots els cromosomes. Les anomalies cromosòmiques més importants que es poden detectar mitjançant la prova FISH en el diagnòstic prenatal són Ullrich Síndrome de Turner (monosomia X), síndrome de triple X (trisomia o polisomia X), Síndrome de Klinefelter, en què hi ha un cromosoma X addicional (XXY en lloc de XY) a totes o part de les cèl·lules somàtiques dels nens, Síndrome de Down (trisomia 21), síndrome d’Edwards (trisomia 18), i síndrome de Pätau (trisomia 13). La monosomia X, en què les nenes només tenen un cromosoma X, sol ser letal, cosa que significa que en aproximadament el 98% dels casos provoca avortament involuntari dins dels tres primers mesos de embaràs. En el cas que encara es produeixi un part, les noies tenen una esperança de vida normal, tenen una intel·ligència mitjana, però sovint pateixen una sèrie de malformacions de òrgans interns i solen ser estèrils. La síndrome de Triple X amb conjunt de cromosomes XXX) també afecta només a les nenes. Normal embaràs i el naixement són possibles. Les dones majoritàriament altes amb el cromosoma triple X poden viure amb normalitat i normalment no presenten anomalies físiques, però aprenentatge les dificultats no són infreqüents i es produeixen problemes amb la motricitat fina. Síndrome de Klinefelter, que només pot afectar homes i nens, es caracteritza per un cromosoma X addicional que està present a totes les cèl·lules del cos o només parcialment. Les característiques físiques inclouen una alçada superior a la mitjana amb braços i cames inusualment llargs. Síndrome de Klinefelter generalment es tradueix en una disminució del creixement testicular amb una disminució testosterona secreció.Síndrome de Down, sinònim de trisomia 21, sol associar-se a certes característiques físiques i a un deteriorament cognitiu. Hi ha diferents formes de trisomia 21, de les quals predomina l’anomenada trisomia lliure 21 amb aproximadament un 95% dels casos. Trisomia 18 (Síndrome d'Edwards) té com a resultat avortament involuntari en la majoria dels casos, s’associa a una varietat de característiques físiques i l’esperança de vida és de pocs dies. La trisomia 13 (síndrome de Pätau) també es caracteritza per una varietat de trets físics i anomalies, i en molts casos provoca avortament involuntari or mort mort. L’esperança de vida dels nens lliurats és de pocs anys. L’objectiu de les proves FISH prenatals és detectar anomalies cromosòmiques conegudes en una etapa primerenca per tal d’oferir als pares l’alternativa d’un tractament legal. avortament portar el nen a terme. En el cas de mama i fetge càncers, els carcinomes es poden comprovar si hi ha un major nombre de HER2 / neu general mitjançant proves FISH. Si és positiu, augmenta la producció de receptors del factor de creixement que responen a determinades quimioteràpies. També hi ha proves FISH disponibles per a la detecció d’específics general anomalies en limfocítics crònics leucèmia (CLL), que milloren el muntatge d’agents eficaços per a quimioteràpia.
Riscos, efectes secundaris i perills
La prova FISH en si no està associada a cap risc ni risc. Només la col·lecció de les cèl·lules a examinar biòpsia o per amniocentesi s’associen a riscos menors d’infecció per la seva naturalesa invasiva. La particularitat és que, tot i que la prova FISH pot detectar algunes aberracions cromosòmiques específiques, no és segur que no hi hagi aberracions cromosòmiques en cas de resultat negatiu, ja que no es poden detectar totes les anomalies mitjançant la prova FISH. En el cas d’un resultat positiu de la prova, s’han de seguir altres procediments de diagnòstic per confirmar o rebutjar el resultat com a fals.
